بررسی جلوگیری از توقف سنتز پروتئین و مرگ سلول میزبان بوسیله یک ژن هرپس سیمپلکس ویروس نوع یک بنام icp۳۴.۵ در یک کشت سلولی با منشاء عصبی بنام sk-n-sh

زمینه و هدف: پا سخ سلولی به عفونت ویروسی بک واکنش پیچیده ای است که شامل القاء اینترفرون می باشد. اینترفرون ها اجزاء مهم و کلیدی پاسخ های ایمنی طبیعی میزبان به عفونت ویروسی بوده و از طریق چندین مکانیزم تکتیر ویروس در سلول و در نتیجه ویرولانس آن را مهار می کند. در سلول های آلوده با ویروسهای مختلف، rna دو رشته ای سنتز می شود که القاء کننده اینترفرون است. آ نزیم پروتئین کیناز r (‍ (pkrبوسیله اینترفرون القاء شده و یک وا سطه مهم و عمده پاسخ سلولی به عفونت ویروسی است. فعالیت این آنزیم منجر به فسفوریله شدن جزء آلفا فاکتور آغاز گر (eif2-a) و در نتیجه توقف سنتز پروتئین در سلول می گردد. در سلول آ لوده با هرپس سیمپلکس ویروس نوع یک (hsv-1)، نیز این عمل منجر به توقف زودرس سنتز پروتئین سلول میزبان می شود ولیکن این ویروس دارای ژ نی بنام icp34.5 است که مانع این عمل در سلول آلوده با این ویروس می گردد. این ژن عامل تکثیر و ویرولانسhsv-1 در سیستم عصبی مرکزی (cns) نیز بوده ولیکن برای تکثیر ویروس در تعدادی از کشت های سلولی ضروری نیست، نقش این ژن در کشت سلولی با منشاء عصبی بنام sk-n-sh آلوده با موتانت های نو تر کیبی ازhsv-1 که اختصا صاً ژن مذکور را بیا ن کند، بررسی نشده است. لذا هدف از این تحقیق، بررسی این نقش بوده است. روش مطالعه: بر ا ساس خاصیت نوترکیبی ژنتیکی، یک موتانت نو ترکیب از ویروس فوق الذکر سا خته شد، درستی اسیدنوکئیک آن با روش ساترن بلاتینگ تایید و سپس با روشهای وسترن بلاتینگ و جلوگیری از توقف سنتز پروتئین، خصوصیات آن بررسی گردید. نتایج: جلوگیری از توقف سنتز پروتئین بوسیله موتا نت نو تر کیب مذکور در مقایسه با یک موتانت حذ فی فا قد این ژن و نیز یک سویه وحشی از hsv-1 بنام (17+) در کشت سلولی sk-n-sh نشان داد که ژن مذکور برای حفظ سنتز پروتئین و در نتیجه تکثیر hsv-1 در این کشت سلولی ضروری می با شد. نتیجه گیری: احتمالاً این ژن مسئول جلوگیری از توقف سنتز پروتئین در سلول های فوق الذکر پس از عفونت با hsv-1 می با شد.